禽流感（H9 亞型）血凝抑制試驗陽性血清使用說明書
日期：2023-12-05 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽：885 次
【獸藥名稱】
通用名稱：禽流感（H9 亞型）血凝抑制試驗陽性血清
商品名稱：無
英文名稱：Avian Influenza Virus (H9 subtype) positive
Serum of Blood Hemagglutination Inhibition Test
漢語拼音：Qiuliugan(H9yaxing)Xueningyizhishiyan
Yangxingxueqing
【【主要成分與含量】本品系用禽流感病毒（H9 亞型）感染 SPF
雞制備，效價≥1:128（即 27）
【性狀】微黃色或淡紅色澄清液體，久置后有少量沉淀。
【作用與用途】用于禽流感（H9 亞型）病毒血凝抑制（HI）試
驗陽性對照
【用法與判定】
1 材料
移液器及吸頭、1/15mol/L PBS（pH 值 7.0-7.2）、96 孔微量血凝
板（V 型）、1%（V/V）雞紅細胞懸液、加樣槽等。
2 試驗操作
2.1 血凝試驗（HA）
96 孔微量血凝板 1-12 孔加入 PBS 0.025ml，取禽流感（H9）血
凝抑制試驗抗原 0.025ml 加入第 1 孔中，反復稀釋 5～10 次混勻，從第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔，稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔，
依此倍比稀釋至第 11 孔。每孔加入 PBS 0.025ml，再加入 1%（V/V）
雞紅細胞懸液 0.025ml。第 12 孔為紅細胞對照孔。將血凝板震蕩混勻，
室溫放置 15～40 分鐘。
2.2 配制 4 個血凝單位抗原（4HAU）
依據(jù)血凝效價，配制 4 個血凝單位抗原（4HAU）。舉例:血凝效
價為 1:128，即 128/4=32（即稀釋倍數(shù)為 1:32）。取 PBS 9.0ml,加入抗
原 1.0ml,（即成 1:10 稀釋）震蕩混勻取 1.0ml，加入 2.2ml PBS 中，
使最終濃度為 1:32。對其血凝價進行回歸檢驗后，2～8℃存放待用。
2.3 血凝抑制試驗（HI）
96 孔微量血凝板 1-11 孔加入 PBS 0.025ml，第 12 孔加入 PBS
0.05ml，取本品 0.025ml 加入第 1 孔中，反復稀釋 5～10 次混勻，從
第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔，稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔，
依此倍比稀釋至第 10 孔。取 4HAU 于 1-11 孔每孔加入 0.025ml，血
凝板震蕩混勻，37℃作用 20 分鐘。再每孔加入 1%（V/V）雞紅細胞
懸液 0.025ml。第 11 孔為 4HAU 對照孔，第 12 孔為紅細胞對照孔。
將血凝板震蕩混勻，室溫放置 15～40 分鐘。
2.4 結(jié)果判定 將血凝板傾斜 60 度，若 4HAU 對照孔無紅細胞凝
集，紅細胞對照孔有紅細胞凝集，且呈明顯流淌的淚滴狀時，試驗成
立，可判讀結(jié)果。使紅細胞凝集被完全抑制的血清最高稀釋度，判為
血清 HI 效價。
【注意事項】1.本品避免反復凍融使用。
2.倍比稀釋時，吸液、吐液動作不應(yīng)過快，防止污染其他孔及取
量不準確。
3.4HAU 應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，使用時充分混勻。
4.使用 1%雞紅細胞懸液時，應(yīng)輕搖混勻。
5.因環(huán)境溫度不同，判定結(jié)果時，可依據(jù)對照孔情況，適當調(diào)整
作用時間。
6.設(shè)立陰、陽性血清對照，且當陰性對照血清 HI 效價≤1:4、陽性
對照血清 HI 效價與已知結(jié)果相比，誤差≤1 個滴度時，試驗方可成立。
【規(guī)格】 2ml/瓶
【貯藏與有效期】 -15℃以下保存，有效期為 12 個月
【包裝】 10 瓶/盒
供獸醫(yī)診斷使用
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