在平板實(shí)驗(yàn)操作的過程中，常常會(huì)碰到用細(xì)菌病毒接種平板后沒有菌落生長(zhǎng)發(fā)育的現(xiàn)象。中海生物技術(shù)小編來探討一下出現(xiàn)這種現(xiàn)象的菌種原因和培養(yǎng)基及添加劑原因和技術(shù)人員操作方法原因等三種因素進(jìn)行分析解釋。

㈠菌種方面的因素:

①菌株沒有完全激活

在我們得到一種菌株時(shí)，該菌株常常處在存儲(chǔ)情況，這就所需小編按照其合理的培養(yǎng)基一代一代地?cái)U(kuò)展培育，以得到充沛的菌株，因此完全活化的目的是使該菌株漸漸適應(yīng)培育必要條件，進(jìn)而在平板上迅速生長(zhǎng)發(fā)育。

②應(yīng)變衰老

假如菌株連續(xù)多次傳代培養(yǎng)高于十多次乃至數(shù)十次，會(huì)造成菌株衰老，生長(zhǎng)發(fā)育遲緩乃至不生長(zhǎng)發(fā)育。

③野生菌株

與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范菌株相比較，一部分野生剝離菌株較為敏感脆弱，營(yíng)養(yǎng)成分所需較高，對(duì)外部欠佳必要條件比較敏感，無(wú)法在普通平板上生長(zhǎng)發(fā)育，常常所需加入特殊的營(yíng)養(yǎng)元素。

④選購(gòu)的商業(yè)化的菌株

一部分商業(yè)化的菌株，如復(fù)合益生菌/菌肥/食用菌菌種等，都?xì)v經(jīng)了基因改造，又不可以連續(xù)傳代培養(yǎng)和擴(kuò)展，因此難以在平板上生長(zhǎng)發(fā)育。

⑤試樣中的細(xì)菌病毒

部分試樣含菌量較少，如水樣和供試品溶液，接種量低造成平板無(wú)菌生長(zhǎng)發(fā)育。一部分試樣富含一部分抑菌其成分，會(huì)殺死試樣中的細(xì)菌病毒，造成平板無(wú)菌生長(zhǎng)發(fā)育。

㈡技術(shù)人員操作方法不規(guī)范的因素：

①實(shí)驗(yàn)操作實(shí)際操作中的出現(xiàn)失誤，尤其是溶解稀釋菌液的過程中，盡量少用或不用菌。

②中海培養(yǎng)基制備的過程中稱取量重不規(guī)范，添加劑配置比例不規(guī)范等。

③器皿沒有洗干凈，鑒于殘余抑菌其成分，細(xì)菌病毒沒有生長(zhǎng)發(fā)育。

④過分殺毒滅菌，中 海培養(yǎng)基的許多其成分不耐高溫，過分殺毒滅菌會(huì)造成其成分不起作用。

⑤不規(guī)范的酸堿度上下調(diào)整，培養(yǎng)基的酸堿值在不一樣的環(huán)境溫度下會(huì)不盡相同，假如酸堿值上下調(diào)整不規(guī)范，細(xì)菌病毒就不易生長(zhǎng)發(fā)育。

⑥沒有合理的培育必要條件，按照其不一樣細(xì)菌病毒對(duì)氧氣的所需狀態(tài)，可以可劃分為需氧/厭氧/微需氧培育。按照其不一樣細(xì)菌病毒的環(huán)境溫度所需，可在25℃/30℃/35℃/42℃/56℃等不一樣環(huán)境溫度下培育。

㈢培養(yǎng)基和添加劑的因素：

①培養(yǎng)基和添加劑高于有效期或臨近有效期，營(yíng)養(yǎng)元素有某種狀態(tài)的不起作用，造成細(xì)菌病毒不生長(zhǎng)發(fā)育。

②特殊專用培養(yǎng)基和添加劑未妥善處理存儲(chǔ)/未遮陰/冷藏/嚴(yán)密密封存儲(chǔ)等，因此造成出錯(cuò)。

③中.海培養(yǎng)基的酸堿值發(fā)生了轉(zhuǎn)變，一部分特殊的制成品培養(yǎng)基的酸堿值會(huì)伴隨著時(shí)長(zhǎng)出現(xiàn)某種狀態(tài)的轉(zhuǎn)變，因此在使用前所需從新修整酸堿值，要不然細(xì)菌病毒不易生長(zhǎng)發(fā)育。

④制成品培養(yǎng)基自身品質(zhì)欠佳，如原料純度低/富含抑菌其成分/原料間配置比例不規(guī)范等，會(huì)造成中海生物培養(yǎng)基質(zhì)量不過關(guān)。

⑤培養(yǎng)基和添加劑沒有營(yíng)養(yǎng)成分或不適宜培育部分菌株。部分菌株有特殊的的營(yíng)養(yǎng)成分所需，所需加入一部分特殊的的營(yíng)養(yǎng)元素才可以生長(zhǎng)發(fā)育。

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