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    LuriaBertani固體液體培養(yǎng)基組成成分與配制

    日期:2021-07-16 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:1115 次

    LB培養(yǎng)基(LuriaBertani)是具有典型性的進(jìn)行各種細(xì)菌培養(yǎng)使用,是分子生物學(xué)的常規(guī)試劑。LB固體培養(yǎng)基粉劑主要是由胰蛋白胨/酵母提取物/氰化鈉瓊脂粉組成,充分溶解于無菌水中,加熱制成固體平板(如果嚴(yán)格要求無菌,則應(yīng)進(jìn)行高壓滅菌)。

     

    中海LB培養(yǎng)基組成成分:

    LB培養(yǎng)基組成成分

    壹升LB固體培養(yǎng)基是和液體一樣,加入15克瓊脂粉,根據(jù)實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)將培養(yǎng)基中加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH在7.0~7.4之間。此pH值適合應(yīng)用最廣泛的原核表達(dá)菌株大腸桿菌的生長。

     

    LB固體培養(yǎng)基

    一定要在溫度下降前加入抗生素,然后將LB固體培養(yǎng)基倒入平板。

    ㈠LB培養(yǎng)基制備:100毫升LB培養(yǎng)基加入1.5克瓊脂粉

    ㈡添加抗生素:高壓蒸汽滅菌再將已融化的LB固體培養(yǎng)基放入55℃熱水中。當(dāng)培養(yǎng)基溫度降到55℃時,可以觸摸添加抗生素并搖勻,以免因溫度過高導(dǎo)致抗生素失效??股亟K濃度為氨芐青霉素 100微克/毫升,卡那霉素 50微克/毫升。

    ㈢倒入平板:將中 海培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后,打開蓋子,在紫外線下照射十至十五分鐘。通常十毫升倒壹板。

    ㈣LB培養(yǎng)基儲存:封邊用封口膠封口,倒置四度環(huán)境保存,三十天內(nèi)使用。

     

    LB液體培養(yǎng)基

    中海生物準(zhǔn)備每升培養(yǎng)基,要加入九百五十毫升DI水中,搖動容器直至溶質(zhì)溶解。用5mol/L 氫氧化鈉 調(diào)節(jié) pH 至 7.0~7.4。用去DI水定容至壹升。在15psi(kgf/cm²)高壓下蒸汽滅菌二十分鐘。中海LB肉湯培養(yǎng)基通常用于生化分子實(shí)驗(yàn)中對菌株進(jìn)行預(yù)培養(yǎng),使菌株增殖達(dá)到要求用。培養(yǎng)的菌株一般都經(jīng)過修飾,不能暴露于外界。僅在環(huán)境中生存和繁殖的工程細(xì)菌。通過中'海培養(yǎng)工程菌,我們可以制備更多的外源蛋白,同時能得到帶有外源基因的質(zhì)粒。工程菌的有效擴(kuò)增是生化分子實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。


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