定做營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制操作要點(diǎn)及常見注意哪些方面
日期:2021-10-25 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:2232 次
簡單講述瓊脂概念:
瓊脂(Agar)是一類從植物中提煉的多糖,主要是來自于海藻植物。在微生物培養(yǎng)基中,瓊脂通常只是用來作為凝固劑使用。液體培養(yǎng)基中瓊脂的增加量一般來說為0.5至2克/升,使中.海培養(yǎng)基有著一定的粘稠度,避免液體相互對流,經(jīng)常使用于厭氧培養(yǎng)。半固體培養(yǎng)基中瓊脂增加量為三點(diǎn)五至四克/升,經(jīng)常使用于菌種保藏和動態(tài)性檢驗(yàn)檢測。固體培養(yǎng)基中瓊脂的添加量為十二至十五克/升。植物組織培養(yǎng)基中瓊脂增加量為五至十克/升。
一般來說,瓊脂粉為白色、淺黃色或淺灰色粉末,不溶解于冷水。只有在加溫?zé)_或高壓滅菌能夠使瓊脂充分均勻溶解。絕大多數(shù)瓊脂的熔點(diǎn)在九十?dāng)z氏度上下,冷卻后后能夠凝結(jié)成固態(tài)。大部分瓊脂的冰點(diǎn)在四十?dāng)z氏度上下。盡管重復(fù)加溫和冷卻后能夠使瓊脂頻繁在液態(tài)和固態(tài)兩者之間發(fā)生變化,同時瓊脂的凝膠強(qiáng)度會隨著反復(fù)的次數(shù)愈來愈低。
配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基操作要點(diǎn)
①通過營養(yǎng)培養(yǎng)基標(biāo)簽貼稱加入適量培養(yǎng)基粉劑溶解于純凈水,加溫?zé)_至瓊脂全部充分均勻溶解,裝進(jìn)試管或錐形瓶中;
②在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的環(huán)境下對分裝的培養(yǎng)基實(shí)行高壓蒸汽滅菌。高壓蒸汽滅菌后的培養(yǎng)基能夠重復(fù)燒開四至六次,直到培養(yǎng)基結(jié)束了。全部充分均勻溶解后,倒進(jìn)盤里,制作而成平板安全使用;
③高壓蒸汽滅菌后,待中'海培養(yǎng)基冷卻后至五十?dāng)z氏度上下后,可放置在四十七至五十?dāng)z氏度的水浴中保溫。水浴工作溫度可通過培養(yǎng)基具體凝結(jié)工作溫度適當(dāng)提升 ,置放時長一般來說不超過四個鐘頭。
④瓊脂培養(yǎng)基操作使用前,添加一定的添加劑物質(zhì),混勻倒進(jìn)平板里,凝結(jié)儲備用;或是制作成斜面傾注使用等。聯(lián)系中海生物5usy.com瓊脂培養(yǎng)基定制咨詢
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制常見注意哪些方面
①充分均勻溶解粉劑時,提議水的溫度在四十?dāng)z氏度以內(nèi),不超過六十?dāng)z氏度。瓊脂曝露在開水中,其外層非常容易吸水發(fā)硬,生成硬結(jié),并不有利于分散化和充分均勻溶解。所以,在充分均勻溶解粉劑時,以涼水為宜,并始終保持?jǐn)嚢柚练稚⒒鶆驘o結(jié)團(tuán),再實(shí)行加溫正確處理;
②高壓蒸汽滅菌前需將瓊脂加溫?zé)_至全部充分均勻溶解分散化均勻,才能分裝試管或錐形瓶;要不然,分裝后應(yīng)該發(fā)生瓊脂分散不均勻、凝固性不一樣的具體情況;高壓蒸汽滅菌前加溫、燒開、充分均勻溶解有利于促進(jìn)加速高壓滅菌環(huán)節(jié)中的熱量滲透性,提升高壓蒸汽滅菌實(shí)際效果,減少高壓蒸汽滅菌不成功的幾率。
③凝固營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基不可以再一次高溫高壓滅菌。假如中海培養(yǎng)基中的物質(zhì)比較穩(wěn)定,它們能夠再一次充分均勻溶解在開水浴中。
④需用增加抗生素或別的不穩(wěn)定物質(zhì)的培養(yǎng)基,在安全使用前要在培養(yǎng)基冷卻后至五十至五十五攝氏度時增加,這樣的物質(zhì)在過早或過熱時增加,非常容易造成不穩(wěn)定因素。不利于不穩(wěn)定物質(zhì)溶解,從而減少培養(yǎng)基安全使用實(shí)際效果;
⑤凝結(jié)后的培養(yǎng)基不可頻繁加溫溶解處理。重復(fù)加溫非常容易溶解培養(yǎng)基中的營養(yǎng)元素,瓊脂的凝膠強(qiáng)度會減少。通常物質(zhì)比較穩(wěn)定的培養(yǎng)基能夠充分均勻溶解一次性使用。
⑥凝結(jié)的瓊脂培養(yǎng)基不可存放在冷藏環(huán)境下。中 海培養(yǎng)基的冷藏會嚴(yán)重破壞瓊脂的內(nèi)部構(gòu)造,造成失去水分或凝固性差,瓊脂特性也發(fā)生了變化。
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