實驗室支原體污染檢查驗證六種鑒別辦法簡述
日期:2021-08-20 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:1188 次
第一種:分離培養(yǎng)法
支原體的致病性檢測為主要通過從受污染的細胞組織中分離培養(yǎng)支原體來確定。分離培養(yǎng)法是支原體污染檢測最可靠最準確的方法。然而支原體對環(huán)境的影響非常敏感,極易被滅活,分離培養(yǎng)操作相對麻煩并且檢測周期長。通常只能對支原體污染檢查進行定性觀察。分離和培養(yǎng)方法常用于輔助支原體常規(guī)檢測中的其他檢測方法。
第二種:DNA熒光染色法
DNA熒光染色法相比分離培養(yǎng)法減少了檢查驗證時長,常用于細胞培養(yǎng)中污染支原體的檢測。DNA熒光染色法是基于熒光染料可以與支原體DNA中的AT堿基富集區(qū)結合的原理。中海檢查被支原體污染的細胞染色后,在細胞核外和細胞周圍可以看到許多大小均勻的組織。
第三種:ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗
ELISA一般用于檢測支原體污染檢驗,具有良好的特異性和靈敏度高,可統(tǒng)一完成大量樣品的檢測,擁有快速定量定性簡單檢測等諸多特點。
第四種:PCR技術
PCR有著快速靈敏特異簡便的基因診斷技術,PCR檢測技術已被用于科學研究和疾病診斷等支原體污染鑒別,其可統(tǒng)一檢測大批量樣本,其有周期短/靈敏度高/特異性好/操作簡單等優(yōu)點。中海生物依據(jù)支原體基因組中的保守序列設計特異性引物,對待測樣品的核酸進行擴增,通過分析擴增產(chǎn)物的大小進行診斷。
第五種:電子顯微鏡
通常細胞培養(yǎng)需兩至三天時間,在細胞接近結合前,將細胞胰酶消化制成細胞懸液,然后用電子顯微鏡在觀察前采用固定嵌入和分段等流程。
第六種:定時周期性檢查
通常情況支原體感染會使培養(yǎng)的細胞逐漸滅亡,所以對培養(yǎng)的細胞進行定期支原體檢測非常重要。支原體污染檢查驗證重點是對實驗室細胞培養(yǎng)進行常規(guī)支原體污染檢測的規(guī)范化,做到每30~90天做一次支原體檢查驗證。
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