ELISA試劑盒挑選注意四個方面
日期:2022-05-10 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:935 次
現(xiàn)在科學(xué)技術(shù)和新興產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,ELISA試劑盒對化學(xué)試劑的純度\純度\精密度的需求越來越嚴(yán)格和專業(yè)化。ELISA試劑盒的挑選很重要,中海生物認(rèn)為大致有四個方面:
?檢測方法
盡管,ELISA試劑盒的檢測方式方法有很多,我們可以按照自身的偏好來選購。通常ELISA檢測酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,抗體與相對應(yīng)的酶結(jié)合,反應(yīng)體系中添加相對應(yīng)的底物。這樣的酶促反應(yīng)造成特征顏色,可以用分光光度計檢測。堿性磷酸酶ap也是一類常見的酶。該酶可以與第一抗體或第二抗體結(jié)合,同時鏈霉親和素標(biāo)記的酶也能夠與親和素標(biāo)記的第一抗體結(jié)合。另外ELISA結(jié)果還包含放射性檢測/熒光檢測/化學(xué)發(fā)光或顯色檢測等。
?實驗操作形式
盡管類型諸多,但會出現(xiàn)一項相同的特點,便是抗原捕獲。捕獲的通常形式包含將抗原吸附到微孔板或在微孔板上用抗體捕獲。酶聯(lián)免疫斑點和in-cell Elisa是兩種特殊類型。in-cellElisa需要將微孔板培養(yǎng)的細(xì)胞固定化/通透化,隨后用抗體原位檢測。酶聯(lián)免疫斑點有點像蛋白印跡,先將細(xì)胞培養(yǎng)在膜微孔板中,隨后在膜上檢測細(xì)胞分泌的抗原,形成斑點。另外中海建議需要按照自身的需要選購九十六孔板或四十八孔板進(jìn)行Elisa實驗操作。
?抗體形式
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用作Elisa,但有時候兩者的組合更好。例如雙抗體夾心法,用多抗體捕捉,用單抗體檢測,有時候更有幫助。多抗體可以確保捕獲全部抗原,隨后單克隆抗體可以特異性檢測具有特定表位的抗原。
?交叉反應(yīng)
假如抗體之間有沖突或交叉反應(yīng),會影響所有實驗操作的特異性??贵w來源的相容性是交叉反應(yīng)的一項原因。盡管從支釘動物身上購買抗體越來越容易,但仍然需要確認(rèn)是不是會出現(xiàn)交叉反應(yīng)。用雙抗體夾心法進(jìn)行Elisa時,檢測用的第二抗體務(wù)必對第一抗體有特異性,但無法與捕獲抗體反應(yīng)。假如檢測二抗和捕獲抗體結(jié)合,實驗操作的特異性會大幅度降低。中海通常選購不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗來規(guī)避以上問題。
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