培養(yǎng)基配制方法與基本流程步驟
日期:2021-09-15 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽:1539 次
一:培養(yǎng)基配制調(diào)配方法的選取采用
同一類調(diào)配培養(yǎng)基配制方法不一樣,其在培養(yǎng)中常會(huì)有某些差別。所以除用到的是標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定方式,應(yīng)嚴(yán)格要求按其規(guī)范做好制備外.中海通常均應(yīng)盡可能搜集相關(guān)數(shù)據(jù)資料.對(duì)其進(jìn)行相對(duì)驗(yàn)證.再按照自身的應(yīng)用目標(biāo)對(duì)其進(jìn)行選取采用,記載其來源于。
二:培養(yǎng)基的制作配備記載
中海生物每一次制備培養(yǎng)基的配制均具有記載,涉及培養(yǎng)推各稱,調(diào)配方法以及來源于.和各類有效成分的代號(hào)(牌號(hào)等因廠家而異)。從而酸堿度值/殺菌消毒的工作溫度和時(shí)長(zhǎng)周期制各的準(zhǔn)確時(shí)間和制備者等,記載應(yīng)另存?zhèn)浯嬉环?,原記載保存文檔歸檔,另存記載隨制好的培養(yǎng)基的配制一并儲(chǔ)放、預(yù)防出現(xiàn)混亂。
三:培養(yǎng)基的配制基本成分的稱量
中海培養(yǎng)基配制的各類基本成分一定要精準(zhǔn)稱量并要小心貯放預(yù)防混亂.盡量一次性完成任務(wù),盡量不要出現(xiàn)異常??蓪⒄{(diào)配方法處于傍側(cè),每稱完一類基本成分即在調(diào)配方法上畫出標(biāo)記,并將所需稱量的制劑一次性取齊取足,處于左側(cè),每種稱量結(jié)束之后后,即移擺到右側(cè)。完完全全稱量結(jié)束之后后.還應(yīng)做好一次性檢查。
四:培養(yǎng)基配制中各有效成分的混和和充分均勻溶解
微生物培養(yǎng)基配制用到化學(xué)試劑均該是比較純的。應(yīng)用的蒸汽鍋不能夠?yàn)殂~鍋或鐵鍋,預(yù)防有少量銅或鐵滲入培養(yǎng)基配制中,使菌株難于成長(zhǎng)。盡量應(yīng)用不銹鋼蒸鍋加溫充分均勻溶解.也可放進(jìn)大量杯或大圓底燒瓶中置高壓高壓蒸汽滅菌或移動(dòng)蒸汽消毒器中蒸制充分均勻溶解。在鍋中充分均勻溶解時(shí)、可首先用溫開水加溫并及時(shí)振蕩,預(yù)防焦化結(jié)焦、如察覺到有焦化焦燒的情況、該培養(yǎng)基的配制即不能夠應(yīng)用,應(yīng)二次制備。待多數(shù)固體基本成分充分均勻溶解后,用較小火力使全部基本成分完完全全充分均勻溶解.迄至燒開。若為中 海瓊脂培養(yǎng)基配制,先要用部分水將瓊脂充分均勻溶解,用另部分水充分均勻溶解別的基本成分,隨后將兩溶劑充沛混和。在加溫充分均勻溶解流程中,因揮發(fā)而流失的水分,最終一定要對(duì)其進(jìn)行補(bǔ)充。
五:培養(yǎng)塞酸堿度的基本調(diào)節(jié)
中海生物技術(shù)zhzbio.com培養(yǎng)基配制各基本成分完完全全充分均勻溶解后,應(yīng)做好酸堿度的基本調(diào)正,因培養(yǎng)基的配制在加溫殺菌消毒流程中、酸堿度會(huì)有一定的轉(zhuǎn)變 ,比方說牛肉浸液約可下降酸堿度0.2.而腸浸液酸堿度卻會(huì)出現(xiàn)明顯的上升。所以對(duì)這種方法步驟,中海技術(shù)工作人員應(yīng)及時(shí)小心探尋實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)、以求能熟練掌握培養(yǎng)基的配制的從而酸堿度,確保培養(yǎng)基的配制的品質(zhì)。酸堿度調(diào)整后,還應(yīng)將培養(yǎng)基的配制燒開數(shù)分鐘,有利于中'海培養(yǎng)基的配制積淀的進(jìn)行析出。
六:培養(yǎng)基的配制需進(jìn)行過濾清沉淀物
液體培養(yǎng)基一定要肯定清澈,瓊脂培養(yǎng)基配制也應(yīng)通透無明顯積淀,所以需要運(yùn)用進(jìn)行過濾或別的清澈方式以做到該項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)。通常液體培養(yǎng)基能用過濾紙過濾法,過濾紙應(yīng)拆折成扇面成漏斗形,以規(guī)避因液壓不均衡而導(dǎo)致過濾紙裂開。
瓊脂培養(yǎng)基要用潔凈的白色薄絨布趁熱過濾。也可以用里面包含薄層吸水性強(qiáng)棉的兩層紗布進(jìn)行過濾。新制肉/肝/血和土豆等浸液時(shí)、則須先用絨布將碎渣濾掉,再用過濾紙反反復(fù)復(fù)進(jìn)行過濾。如過濾法不可以做到清澈標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定、則須用蛋清清澈法。將要降溫至五十五至六十?dāng)z氏度的培養(yǎng)基倒入大的三角燒瓶?jī)?nèi),裝進(jìn)量不能超出圓底燒瓶容積的二分之二,每一千毫升培養(yǎng)基添加一兩個(gè)雞蛋的蛋白.強(qiáng)力振搖三五分種,置高壓蒸汽滅菌器中、一百二十一攝氏度加溫二十分、取下趁熱以絨布進(jìn)行過濾就可以了。若能自主沉淀物者,也可以靜放冰箱冷藏室中二十四小時(shí)至四十八小時(shí)、吸走其上清液就可以了。
七:培養(yǎng)基的分開包裝
培養(yǎng)基的分開包裝,應(yīng)按使用的目標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,分開包裝于試管、圓底燒瓶等適度玻璃容器內(nèi)。分開包裝量不能超出玻璃容器裝盛量的三分之二。玻璃容器口要用墊有除潮去濕紙的棉塞堵漏,另外還兩用防水紙包扎(現(xiàn)試管通常情況下大多使用螺旋式蓋者)。分開包裝時(shí)盡量能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分析分開包裝器。分開包裝瓊脂抖面培養(yǎng)基時(shí),分開包裝量要以能產(chǎn)生三分之二底層和三分之一斜面的量為合理。分開包裝玻璃容器應(yīng)該給予先清洗干凈并且經(jīng)過干烤消毒殺菌,以利于培養(yǎng)基的完全消毒滅菌。同批培養(yǎng)基應(yīng)此外分開包裝二十毫升培育鑒于一個(gè)小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基一起消毒滅菌,覺得檢測(cè)該批培養(yǎng)基最后酸堿值的用處。
八:培養(yǎng)基消毒滅菌
通常情況下培養(yǎng)基可選用一百二十一攝氏度高壓蒸汽消毒滅菌十五分的方式。在各種各樣培養(yǎng)基配制流程步驟中,海如無特別明文規(guī)定,就可以了用此法進(jìn)行培養(yǎng)基消毒滅菌。
某種怕熱物質(zhì),如糖類應(yīng)再行配制百分之二十或提高一些的濃液,以進(jìn)行過濾或間歇性消毒滅菌法消毒殺菌,之后再用無菌操作原則技術(shù)應(yīng)用、定量分析加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦使用較低環(huán)境溫度消毒滅菌。血液、體液和抗生素等則應(yīng)是無菌操作原則技術(shù)應(yīng)用實(shí)現(xiàn)和添加于經(jīng)降溫約五十?dāng)z氏度上下的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在消毒滅菌后馬上取下、待冷至五十五至六十?dāng)z氏度時(shí),擺放成適度斜面、待其自然而然凝固。
九:培養(yǎng)基品質(zhì)檢測(cè)
同批培養(yǎng)基配制好之后.應(yīng)認(rèn)真仔細(xì)一次:如發(fā)覺開裂、水分浸入、色彩出現(xiàn)異常、棉塞被培養(yǎng)基浸染等、均應(yīng)挑出來?xiàng)壢ァ2z測(cè)其最后酸堿值。將所有中海培養(yǎng)基倒入三十六正負(fù)一攝氏度的恒溫箱培育隔夜,如發(fā)覺有菌生長(zhǎng),即棄去。用相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定菌株接種一兩管或瓶培養(yǎng)基,培育二十四至四十八鐘頭,如無菌操作原則生長(zhǎng)或生長(zhǎng)欠佳。應(yīng)查詢驗(yàn)證因素并反復(fù)接種一回,若結(jié)論仍同之前,則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去,不可以使用。
十:培養(yǎng)基儲(chǔ)存環(huán)境
中.海培養(yǎng)基應(yīng)存貯于冷陰暗處庇蔭,盡量能擺放在普通冰箱內(nèi)。置放時(shí)長(zhǎng)不適宜超出一星期,傾注的平板培養(yǎng)基不適宜超出七十二小時(shí)。同批各次培養(yǎng)基均務(wù)必附帶該批培養(yǎng)基制備的各項(xiàng)記載副頁(yè)或顯著標(biāo)識(shí)。
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