中海生物技術(shù)關(guān)于培養(yǎng)基制備zhzbio.com培養(yǎng)基使用的常見六個(gè)問題做以下解答，希望會(huì)對(duì)大家有所幫助。

問題一：低血清培養(yǎng)基的pH值可以用肉眼判斷嗎？

解答：低血清培養(yǎng)基中 海酚紅的含量與正常培養(yǎng)基中酚紅的含量不同。pH 值無法通過目測或經(jīng)驗(yàn)確定。倡導(dǎo)采取專用pH計(jì)進(jìn)行檢測判定。 

問題二：低血清培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)是什么？

解答：平衡鹽一般由無機(jī)鹽和葡萄糖組成。平衡鹽包括有Earles系統(tǒng)/Hanks系統(tǒng)/Dulbeccos磷酸緩沖鹽系統(tǒng)等。MEM系列培養(yǎng)基和199系列培養(yǎng)基均有Hanks系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earles系統(tǒng)的培養(yǎng)基。然而部分培養(yǎng)基采用的不是上述常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)，舉例RPMI 1640培養(yǎng)基和F12培養(yǎng)基。MEM(SLM)低血清培養(yǎng)基也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)，其平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強(qiáng)于常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)。 

問題三：谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的制備方法是什么？

解答：以制備0.2摩爾/升的L-谷氨酰胺為例：稱取2.92克L-谷氨酰胺，加100毫升注射用水，完全攪拌均勻。使用0.2μm濾膜過濾除菌。溶液需在 4°C 下儲(chǔ)存并避光，并在14天內(nèi)使用。以制備7.5%碳酸氫鈉為例：稱取7.5克碳酸氫鈉溶解于100毫升蒸餾水中除菌過濾。 

問題四：什么樣的培養(yǎng)基可以不加酚紅？

解答：酚紅在培養(yǎng)基中主要用作pH指示劑：酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)呈紫色，呈中性時(shí)為紅色。酚紅本身不影響中海生物制品質(zhì)量，能夠通過純化技術(shù)去除。然而無血清培養(yǎng)基中的酚紅可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈉、鉀失衡并影響細(xì)胞孕育。這種效果必然可以被血清吸收和或減輕。酚紅不是中.海培養(yǎng)基中需求的重要成分。國外許多疫苗或抗體制造商在制作生產(chǎn)過程中使用無酚紅培養(yǎng)基。 

問題五：為什么放入冰箱的培養(yǎng)基顏色會(huì)發(fā)生改變？

解答: 培養(yǎng)基儲(chǔ)藏在4°C的冰箱中。培養(yǎng)基中的二氧化碳會(huì)逐漸釋放，使培養(yǎng)基堿性越大。通常培養(yǎng)基中海的酸堿指示劑是酚紅，隨著堿度的增加，顏色也隨之變深變紅。倘若培養(yǎng)基堿性太強(qiáng)又用在細(xì)胞培養(yǎng)上，勢必會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長停滯與死亡。當(dāng)培養(yǎng)基堿性太強(qiáng)狀態(tài)需要通過無菌過濾的二氧化碳來調(diào)節(jié)pH值。 

問題六：有血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基的抗生素用量相同嗎？

解答：在無血清培養(yǎng)環(huán)境情況，抗生素是不會(huì)被滅活。中'海無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時(shí)，至少降低血清中使用的濃度50%。由于血清中的蛋白質(zhì)相互結(jié)合并滅活部分抗生素。

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