實(shí)驗(yàn)室自用培養(yǎng)基存放和商品化培養(yǎng)基儲(chǔ)藏需注意的問(wèn)題
日期:2021-11-01 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽:2097 次
一、檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室自用培養(yǎng)基存放
在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中,偶爾制備的微生物培養(yǎng)基沒(méi)有用完,必須儲(chǔ)存再次使用,很多時(shí)候需預(yù)先制備更多培養(yǎng)基備用,常常會(huì)面臨半成品培養(yǎng)基的儲(chǔ)存情況。取決于半成品或成品培養(yǎng)基有效期的關(guān)鍵原因是光澤/穩(wěn)定/密封性。
⑴成份很簡(jiǎn)單的純營(yíng)養(yǎng)成分類培養(yǎng)基:這樣的中海培養(yǎng)基較為比較穩(wěn)定,一般而言室內(nèi)溫度可儲(chǔ)存數(shù)日或幾個(gè)星期,若密閉遮光冷凍冷藏儲(chǔ)存,一般而言可儲(chǔ)存幾個(gè)月。
注:固體培養(yǎng)基用前可水浴加熱或用微波爐加熱溶解,一般而言只可以溶解一回,頻繁的熱處理溶解會(huì)造成營(yíng)養(yǎng)成分減少和瓊脂變的軟,如只含蛋白胨/氯化鈉/磷酸鹽等成份較為比較穩(wěn)定的中海培養(yǎng)基,營(yíng)養(yǎng)肉湯/LB肉湯/緩沖蛋白胨水等。
⑵需添加不穩(wěn)定成份的不完全培養(yǎng)基:可將未添加不穩(wěn)定成份的基礎(chǔ)性培養(yǎng)基在室內(nèi)溫度(一般而言可儲(chǔ)存數(shù)日)或冷凍冷藏密閉(一般而言可儲(chǔ)存幾個(gè)星期或幾個(gè)月)儲(chǔ)存,臨用前再添加不穩(wěn)定成份制作而成完善培養(yǎng)基。若已添加不穩(wěn)定成份,應(yīng)在二至八攝氏度冷凍冷藏儲(chǔ)存,盡早使用,如添加卵黃的MYP/添加羊血的血瓊脂/添加抗生素的培養(yǎng)基等。注:一些液體培養(yǎng)基可以冷凍保存,溶解后不影響使用,但不可以冷凍包含瓊脂培養(yǎng)基,結(jié)冰會(huì)破壞瓊脂結(jié)構(gòu);固體培養(yǎng)基在使用前需加熱溶化后再加入不穩(wěn)定成分,加入不穩(wěn)定成分后不可再加熱。
⑶只能加熱滅菌或過(guò)濾除菌的培養(yǎng)基:此類培養(yǎng)基相對(duì)較不穩(wěn)定,建議現(xiàn)配現(xiàn)用,或二至八攝氏度冷藏保存數(shù)日,如XLD/亞硒酸鹽胱氨酸增菌液等,內(nèi)含不耐熱成分。
二、商品化成品培養(yǎng)基儲(chǔ)藏(脫水干燥培養(yǎng)基5usy.com即用型培養(yǎng)基)
(1)脫水干燥培養(yǎng)基儲(chǔ)存
①相對(duì)濕度:干粉培養(yǎng)基極具較強(qiáng)的吸濕性,于是必須在儲(chǔ)存的干燥的區(qū)域環(huán)境中,尤其是早已經(jīng)開(kāi)啟的培養(yǎng)基,必須盡量避免在相對(duì)濕度低的區(qū)域環(huán)境中密閉儲(chǔ)存。如儲(chǔ)存環(huán)節(jié)中察覺(jué)培養(yǎng)基產(chǎn)生受潮結(jié)坨成塊/粘稠變色等狀況,則不可以使用。
注:部分培養(yǎng)基因干粉中添加了吐溫80,化學(xué)式為C24H44O?(C?H?O)?。(如MRS培養(yǎng)基)等液態(tài)成份,粉末稍有黏連或小團(tuán)狀,能夠很簡(jiǎn)單壓碎,未必是受潮造成,不會(huì)影響使用。
②環(huán)境溫度:多數(shù)商品化脫水培養(yǎng)基可常溫狀態(tài)儲(chǔ)存(一般而言指十至三十?dāng)z氏度)或陰涼處儲(chǔ)存(一般而言指不超過(guò)二十?dāng)z氏度),關(guān)于含不穩(wěn)定成份的培養(yǎng)基(如有些抗生素\顯色底物等),可在二至八攝氏度冷凍冷藏儲(chǔ)存。儲(chǔ)存環(huán)境溫度過(guò)高易造成有些不穩(wěn)定成份變性或降解。
③光照強(qiáng)度:中.海任何培養(yǎng)基都應(yīng)防止陽(yáng)光照射,放置在陰暗處儲(chǔ)存,含對(duì)光比較敏感成份的培養(yǎng)基應(yīng)使用一定的遮光辦法儲(chǔ)存。
中海小結(jié):區(qū)域環(huán)境的相對(duì)濕度、環(huán)境溫度和光照強(qiáng)度是會(huì)影響培養(yǎng)基儲(chǔ)存有效期限的關(guān)鍵要素,未打開(kāi)的商品化培養(yǎng)基應(yīng)遵循詳細(xì)說(shuō)明放置在特定的環(huán)境下儲(chǔ)存,已打開(kāi)的中 海培養(yǎng)基應(yīng)使用合適的密閉辦法,或盡量避免減少儲(chǔ)存區(qū)域環(huán)境的環(huán)境溫度與相對(duì)濕度,更能幫助培養(yǎng)基的儲(chǔ)存。
(2)即用型培養(yǎng)基儲(chǔ)存
⑴試管或液體瓶裝培養(yǎng)基/均質(zhì)袋等:商品化的即用型通常采取了有效的滅菌方式和密封保存,未開(kāi)封前按說(shuō)明保存即可;若已開(kāi)封,應(yīng)做好有效措施防止污染,密閉保存,含不穩(wěn)定成分的應(yīng)冷藏保存。
注:一些含染料或酸堿指示劑的中'海培養(yǎng)基應(yīng)注意避光保存,如煌綠乳糖膽鹽/RV肉湯/乳糖蛋白胨等培養(yǎng)基,長(zhǎng)時(shí)間見(jiàn)光易發(fā)生變色。
⑵瓊脂斜面/平皿等:大多數(shù)商品化的瓊脂培養(yǎng)基建議保存在二十?dāng)z氏度左右的環(huán)境中,含不穩(wěn)定成分的瓊脂培養(yǎng)基可置于五攝氏度左右的冷庫(kù)中保存。
①目前市場(chǎng)上大多數(shù)的平皿保存溫度都寫(xiě)室溫或五至二十五攝氏度的一個(gè)很寬的保存范圍,但在實(shí)際保存過(guò)程中受水份蒸發(fā)和冷凝水的影響,建議保存在二十?dāng)z氏度左右效果更佳,溫度過(guò)低易出現(xiàn)冷凝水,溫度過(guò)高易導(dǎo)致中海生物培養(yǎng)基失水。
②不建議使用普通冰箱保存。冰箱的溫度相對(duì)不穩(wěn)定,制冷過(guò)程中 海溫度偏低易起霜/易導(dǎo)致培養(yǎng)基結(jié)冰,長(zhǎng)期在冰箱中保存易導(dǎo)致瓊脂出現(xiàn)冰晶,結(jié)構(gòu)被將破壞。若要使用普通冰箱,建議將中.海生物培養(yǎng)基放置在遠(yuǎn)離制冷或靠壁的位置,冷藏溫度盡量調(diào)高一些。
③拆封后的平皿不易久存,因?yàn)樵诜敲荛]環(huán)境中平皿易逐漸失水變薄。
⑶即用型生化管/鑒定條等:一些成分簡(jiǎn)單的生化管(如蛋白胨水/嗜鹽性胰胨水等)可在室溫條件下存放較長(zhǎng)時(shí)間,含酸堿指示劑的需要避光保存,在冷藏條件下可保存更長(zhǎng)時(shí)間。
⑷試劑盒/染色液等:建議按照說(shuō)明書(shū)保存,冷藏條件更穩(wěn)定。
中海生物總結(jié):低溫/避光/密封/工藝等決定即用型培養(yǎng)基的有效期長(zhǎng)短關(guān)鍵外在因素。對(duì)于含不穩(wěn)定成分的培養(yǎng)基,低溫和避光是延長(zhǎng)有效期的重要方法;對(duì)于包含瓊脂培養(yǎng)基,在冷藏時(shí)需注意不可使培養(yǎng)基結(jié)冰。
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