生物緩沖液（PBS、HEPES）優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比
日期：2022-06-10 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽：1686 次
生物緩沖液能有效穩(wěn)定水溶液的pH值，所以被大量應(yīng)用于生物實(shí)驗(yàn)中。殊不知，以往常用的傳統(tǒng)緩沖液，如碳酸鹽緩沖液和磷酸鹽緩沖液，不適用來(lái)某些生物實(shí)驗(yàn)中。這些試劑在pH7.5以上不能有效緩沖，會(huì)形成某些干擾反應(yīng)。所以，1966年NormanGood博士等人提出了一系列兩性離子緩沖液，可以解決傳統(tǒng)緩沖液的局限性。這些緩沖液的pKa值等于或接近生理pH值，對(duì)細(xì)胞無(wú)毒，不會(huì)被細(xì)胞膜吸收。在此中海生物技術(shù)小編簡(jiǎn)述一下經(jīng)常使用的PBS緩沖劑和HEPES生物緩沖液優(yōu)缺點(diǎn)。
生物緩沖液（PBS、HEPES）優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比
| PBS | HEPES | |
| 有效的pH范圍 | 5.8-8.0 | 6.8-8.2 |
| 生物毒性 | 不具生物毒性 | |
| 滲透壓 | 具備等滲透壓的特性，可防止細(xì)胞破裂。 | 使用 0.1 M HEPES 顯著提高了培養(yǎng)基的滲透壓。 |
| 細(xì)胞活力 | PBS 稀釋的細(xì)胞培養(yǎng)樣品可能會(huì)無(wú)意中降低細(xì)胞活力。 | HEPES 緩沖系統(tǒng)中可以看到更高的最大細(xì)胞密度和活力。 |
| 與金屬離子的關(guān)系 | 與部分金屬離子結(jié)合會(huì)產(chǎn)生絡(luò)合物或沉淀。 | 可以忽略不計(jì)的金屬離子產(chǎn)生絡(luò)合物或沉淀。 |
| 與酶促反應(yīng)的關(guān)系 | 可能會(huì)抑制酶促反應(yīng) | 適合用于酶促反應(yīng) |
| HClO熒光檢測(cè) | 適用 | 不適用 |
| 在冷凍情況下的變化 | PBS 溶液的冷凍導(dǎo)致顯著的 pH 變化。 | HEPES 溶液的冷凍不會(huì)導(dǎo)致 pH 變化。 |
| 用于電子顯微鏡研究的前綴固定劑 | 由于磷酸鹽與二價(jià)陽(yáng)離子有關(guān)。較高濃度的PBS會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重沉淀，從而阻止細(xì)胞有效過(guò)濾到過(guò)濾器上使用 | Hepes 代替 PBS 避免了這種沉淀 |
| 用于層析法 | 于層析法中適用 | |
| 高壓滅菌 | 可以高壓滅菌 | 不可以高壓滅菌 |
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