在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)操作的過(guò)程中常常會(huì)存在復(fù)測(cè)問(wèn)題，即咱們常常說(shuō)的花板問(wèn)題，此種問(wèn)題影響到檢驗(yàn)檢測(cè)結(jié)論的準(zhǔn)確判定，對(duì)工作任務(wù)帶來(lái)相應(yīng)的不良影響，如若產(chǎn)生花板現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)操作結(jié)論務(wù)必選擇放棄，中海生物操作員需再次開(kāi)展檢驗(yàn)檢測(cè)，不但消耗原材料和時(shí)長(zhǎng)，同時(shí)還可能會(huì)存在樣本量缺失/交叉式被污染/匯報(bào)時(shí)間延遲等多方面問(wèn)題。

㈠標(biāo)本問(wèn)題

要嚴(yán)格規(guī)范正確處理樣本，預(yù)防血漿層大規(guī)模溶血和異物，使用一次性采樣槍頭，避免交叉污染。血清和血漿均可用于檢測(cè)，但血清的分離應(yīng)在血液完全凝固后進(jìn)行離心操作。

㈡試劑問(wèn)題

保存并正確使用有效試劑。與金屬容器接觸的過(guò)期試劑和底物的使用，以及底物混合后較長(zhǎng)的儲(chǔ)存時(shí)間都影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。中海選擇試劑時(shí)，應(yīng)選擇靈敏度高\(yùn)特異性好\穩(wěn)定性好\批間差異小的試劑。不同制造商的試劑不應(yīng)混合，包括底物和洗滌液。測(cè)試前，獸用診斷試劑應(yīng)在室溫下放置半小時(shí)進(jìn)行平衡，現(xiàn)在應(yīng)準(zhǔn)備好清洗液。同時(shí)中海生物觀察濃縮清洗液中是否有結(jié)晶。如果有結(jié)晶，放入三十七度的水浴中融化后再使用。

㈢操作問(wèn)題

嚴(yán)格按照相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行試驗(yàn)。中海生物技術(shù)人員添加樣品時(shí)，盡可能垂直添加樣品，并將其添加到涂層孔的底部。注意：不要過(guò)度用力破壞底部涂層材料，也不要將其添加到孔的上部和外部。

㈣溫浴問(wèn)題

當(dāng)水浴箱用作溫水浴裝置時(shí)，應(yīng)注意水深對(duì)結(jié)果的影響。當(dāng)水浴箱中水的實(shí)測(cè)溫度為三十七度時(shí)，水面溫度可能只有三十四度，空氣溫度更低，甚至只有二十多度。因此當(dāng)水浴箱內(nèi)水位過(guò)低時(shí)，酶標(biāo)微孔板不會(huì)浸入水中，反應(yīng)溫度不會(huì)達(dá)到三十七度，會(huì)相應(yīng)影響酶促反應(yīng)。為了防止邊緣效應(yīng)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)板應(yīng)盡可能浸入水中，從而保證加熱均勻。水浴中，海應(yīng)密封酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)板，防止水滴滴入包被孔或陽(yáng)性樣品蒸發(fā)。嚴(yán)格控制暖浴時(shí)間，不要為了早出效果而隨意縮短暖浴時(shí)間。

㈤洗板機(jī)問(wèn)題

廢液瓶裝滿后要及時(shí)倒空，防止廢液回流污染管道，導(dǎo)致沖洗不徹底，容易出現(xiàn)花板。洗完板后用蒸餾水徹底清洗管道，防止廢液殘留在管道內(nèi)。同時(shí)應(yīng)根據(jù)中海儀器維護(hù)程序定期維護(hù)洗衣機(jī)。

㈥酶標(biāo)儀問(wèn)題

酶標(biāo)儀應(yīng)放在遮陽(yáng)避光的地方，比色前應(yīng)打開(kāi)預(yù)熱十五至三十分鐘，這樣測(cè)定結(jié)果會(huì)更穩(wěn)定。為防止顯色加深或減弱，顯色時(shí)間結(jié)束后應(yīng)立即滴止液，避免產(chǎn)生氣泡，十分鐘內(nèi)完成比色。將酶標(biāo)板從水浴箱中取出后，擦去孔底的水滴。如果有水滴或紙屑?xì)埩粼诳椎?，酶?biāo)閱讀器的讀數(shù)就會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤，往往被誤判為花板。

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