硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(TG)用途/原理/特性及注意問題
日期:2021-08-06 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽:1626 次
㈠TG培養(yǎng)基用途:
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基大多用于培養(yǎng)厭氧/需氧/微需氧微生物,是培養(yǎng)厭氧菌的主要培養(yǎng)基。TG培養(yǎng)基在2020版中國(guó)獸藥典中用于藥品及中海生物制品等的無菌檢測(cè),對(duì)需氧菌和厭氧菌的檢驗(yàn),起著尤為重要的作用。
㈡硫鹽培養(yǎng)基原理:
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(TG)主要包含葡萄糖/氯化鈉/硫乙醇酸鹽/刃天青/胰酪蛋白胨/酵母浸出粉/L-胱氨酸(半胱氨酸鹽酸鹽)/瓊脂等成分。
①葡萄糖為微生物提供碳源和能量;
②氯化鈉維持平衡的滲透壓和酸堿平衡;
③還有中'海硫乙醇酸鹽可以鈍化砷和含汞藥物等金屬防腐劑刃天青的有害作用;
④作為氧化還原指示劑的刃天青被氧化時(shí)呈紅色,表示中.海培養(yǎng)基的氧化還原電位;
⑤胰酪蛋白胨和酵母提取物提供氮源和蛋白質(zhì)合成所必需的各種氨基酸和生長(zhǎng)因子;
⑥瓊脂可以阻止液體對(duì)流,即阻止氧氣/二氧化碳/和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散,有利于形成厭氧環(huán)境;
⑦胱氨酸/葡萄糖/硫乙醇酸鹽均可以降低氧化還原電位的作用,防止過氧化物的積累對(duì)某些細(xì)菌產(chǎn)生毒性,促進(jìn)厭氧菌的生長(zhǎng)。
㈢從中海硫鹽培養(yǎng)基的成分分析可以得出,硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(TG)特性是:
①成分相對(duì)比較簡(jiǎn)單,容易制作生產(chǎn)。
②包含更全面的營(yíng)養(yǎng),比較符合大部分細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)需求;
③不同深度的培養(yǎng)基的上/中/下部分可以分別模擬一個(gè)從有氧→弱氧→無氧不同氧含量的梯度環(huán)境,使厭氧菌/兼性厭氧菌/好氧菌都可以在TG培養(yǎng)基上生長(zhǎng)
④含有少量瓊脂,其流動(dòng)性不同于普通液體培養(yǎng)基。
㈣中海制作硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(TG)時(shí),特別注意以下四個(gè)方面問題:
①刃天青要新鮮配制,否則會(huì)影響結(jié)果判斷。
②培養(yǎng)基在滅菌后到使用過程中不要搖晃,因培養(yǎng)基振動(dòng)進(jìn)而進(jìn)入氧氣,這將會(huì)影響培養(yǎng)基的正常使用。接種操作需快速靈活,減少培養(yǎng)基被氧化的可能。
③接種前,如果氧化層的粉紅色超過培養(yǎng)基深度的五分之一,則必須在水浴煮沸二十分鐘加熱至粉紅色消失,然后迅速冷卻。記住培養(yǎng)基僅可加熱一次,否則培養(yǎng)基質(zhì)量降低。
④中海生物硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基zhzbio.com硫鹽TG培養(yǎng)基含有少量瓊脂。滅菌后培養(yǎng)基應(yīng)無渾濁。但放置一會(huì)即會(huì)出現(xiàn)輕微的混濁,特別是放入冰箱存放后,有特別明顯的混濁。濁度的高低有可能與培養(yǎng)基所用瓊脂的質(zhì)量有關(guān)(考慮更換培養(yǎng)基廠家或批號(hào),或者更換瓊脂),也可能與殺菌的徹底性有關(guān)(仔細(xì)檢查滅菌操作和滅菌設(shè)備),無論哪種情況都應(yīng)具體分析解決。
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