㈠ELISA試驗(yàn)檢測(cè)存在比較弱的結(jié)論，中海生物認(rèn)為大致存在七種影響因素及其處理辦法：

 

問題⑴：溫育的時(shí)長(zhǎng)以及環(huán)境溫度不足；

 

處理辦法：校準(zhǔn)溫育箱環(huán)境溫度。

 

問題⑵：顯色反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)實(shí)在太短暫；

 

處理辦法：校準(zhǔn)電子定時(shí)器精確指定時(shí)間。

 

問題⑶：常用制備緩沖液的蒸餾水出現(xiàn)問題；

 

處理辦法：采用新鮮的符合標(biāo)準(zhǔn)的蒸餾水。

 

問題⑷：添加抗體/酶的稀釋液溶液濃度太低；

 

處理辦法：遵循使用中'海說明書介紹貯存試劑盒和精確制備工作液。校準(zhǔn)移液器，吸嘴要匹配，裝吸嘴時(shí)要緊密。

 

問題⑸：酶標(biāo)儀濾色片不符合規(guī)定的；

 

處理辦法：常規(guī)檢查酶標(biāo)儀采用的濾色片。

 

問題⑹：ELISA試劑盒沒能有效充分的穩(wěn)定平衡；

 

處理辦法：ELISA實(shí)驗(yàn)試劑在常溫穩(wěn)定平衡不低于二十分鐘左右，切實(shí)保障全部實(shí)驗(yàn)試劑已穩(wěn)定平衡至在常溫。

 

問題⑺：不符合規(guī)定的的實(shí)驗(yàn)試劑貯存方式辦法；

 

處理辦法：遵循使用說明書介紹規(guī)范要求貯存試劑盒。

 

㈡試驗(yàn)檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定辦法的重復(fù)性差，那究竟是怎么回事造成的？

 

它主要是由測(cè)定辦法實(shí)際操作造成的問題現(xiàn)象，主要根本因素如下所示：

 

問題⑴：加樣本及實(shí)驗(yàn)試劑量不準(zhǔn)確；板孔不一致；

 

處理辦法：校準(zhǔn)移液器，吸嘴要匹配，裝吸嘴時(shí)要嚴(yán)密。反復(fù)某一產(chǎn)品的樣品時(shí)，加樣時(shí)長(zhǎng)盡量避免與首次貼近；反復(fù)檢測(cè)生物標(biāo)本，技術(shù)人員操作辦法維持不變，減少出現(xiàn)結(jié)果不同的幾率原因；產(chǎn)品的樣品稀釋前須有效充分的混合均勻。

 

問題⑵：加樣過快，板孔產(chǎn)生污染源；

 

處理辦法：反復(fù)測(cè)定辦法生物標(biāo)本，實(shí)際操作前提條件是中海生物技術(shù)人員等應(yīng)盡量避免與之前維持不變，以解決這類因素帶來的不一致的概率；注意加樣千萬別過快。

 

問題⑶：錯(cuò)加樣本；

 

處理辦法：檢查記錄和實(shí)驗(yàn)試劑，有沒有錯(cuò)加樣本。

 

問題⑷：加樣本及實(shí)驗(yàn)試劑時(shí)，放在孔壁上部非包被區(qū)；

 

處理辦法：加樣槍嘴千萬別貼容器壁。

 

問題⑸：不一樣生產(chǎn)批號(hào)試劑盒中成分混合使用；

 

處理辦法：不一樣生產(chǎn)批號(hào)試劑盒中成分不能夠混合使用。

 

問題⑹：溫育時(shí)長(zhǎng)、洗板、顯色時(shí)長(zhǎng)不一致；

 

處理辦法：中.海常規(guī)檢查時(shí)長(zhǎng)有沒有相同。

 

問題⑺：孔內(nèi)污染源雜質(zhì)；

 

處理辦法：離心產(chǎn)品的樣品，解決雜質(zhì)。

 

問題⑻：實(shí)驗(yàn)試劑/產(chǎn)品的樣品沒能混合均勻；

 

處理辦法：有效充分的混合均勻產(chǎn)品的樣品和實(shí)驗(yàn)試劑。

 

問題⑼：血清生物標(biāo)本未充分凝結(jié)即添加，反應(yīng)孔內(nèi)存在纖維蛋白凝結(jié)或存留血細(xì)胞，易存在假陽性反應(yīng)等。

 

處理辦法：待血清生物標(biāo)本充分凝結(jié)后做試驗(yàn)檢測(cè)。

 

㈢試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)論白板，同時(shí)陽性對(duì)照不顯色，應(yīng)怎樣研究和搜索根本原因？

 

試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示白板，同時(shí)陽性對(duì)照不顯色，普遍根本原因如下所示：

 

問題⑴：漏加或是誤加實(shí)驗(yàn)試劑；

 

處理辦法：常規(guī)檢查試驗(yàn)檢測(cè)記載和余下的實(shí)驗(yàn)試劑。次次加液前均應(yīng)核查標(biāo)簽貼。

 

問題⑵：實(shí)驗(yàn)試劑逾期；

 

處理辦法：采用有效期限內(nèi)的中海產(chǎn)品。

 

問題⑶：發(fā)現(xiàn)洗板液制備中如容量瓶不干凈含HRP酶抑制物等情況；

 

處理辦法：中海生物技術(shù)采用干凈整潔的容器，科學(xué)合理制備實(shí)驗(yàn)試劑。

 

問題⑷：溫育的時(shí)長(zhǎng)或環(huán)境溫度不足；

 

處理辦法：校準(zhǔn)溫育箱環(huán)境溫度。

 

問題⑸：標(biāo)準(zhǔn)品失活或是丟失；

 

處理辦法：標(biāo)準(zhǔn)品科學(xué)合理儲(chǔ)存、充分均勻溶解和混勻。

 

問題⑹：抗體失活或是丟失；

 

處理辦法：替換抗體或是提升抗體濃度值

 

問題⑺：酶失活或是丟失

 

常規(guī)檢查手段：把正常濃度值的酶再進(jìn)行稀釋二十至一百倍，取五微升添加五十微升的顯色底物，結(jié)束后顯色有沒有能到達(dá)壹上下，可做為酶的大概估測(cè)。

 

處理辦法：替換酶或是提升酶的濃度值。

 

問題⑻：顯色底物失活

 

常規(guī)檢查手段：加一定量的工作濃度值的酶，TMB有沒有快速顯色。

 

解決辦法：替換顯色底物.

 

㈣試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示空白背景高，其普遍根本原因如下所示：

 

問題⑴：洗板不干凈；

 

處理辦法：充分的清洗，完全拍干；洗板要杜絕交叉式造成污染；濃縮洗液準(zhǔn)確無誤制備；吸嘴最好使用一次；加樣和加酶拍板的濾紙應(yīng)丟掉不用，更不要多次采用，不然易產(chǎn)生造成污染。

 

問題⑵：顯色液發(fā)生變質(zhì)或是實(shí)驗(yàn)試劑逾期；

 

處理辦法：常規(guī)檢查試劑盒有效期限。

 

問題⑶：實(shí)驗(yàn)試劑進(jìn)行稀釋不正確，如加酶的濃度值過高；

 

處理辦法：請(qǐng)按照中 海使用說明書所述的稀釋倍數(shù)制備；

 

問題⑷：蒸溜水受酶等造成污染；

 

處理辦法：中海生物采用新鮮的蒸溜水；

 

問題⑸：實(shí)驗(yàn)試劑混合使用；

 

處理辦法：不一樣生產(chǎn)批號(hào)實(shí)驗(yàn)試劑勿混合使用。

 

問題⑹：恒溫培養(yǎng)箱環(huán)境溫度高于三十七攝氏度或持續(xù)時(shí)間太久。

 

處理辦法：顯色反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)盡可能減少。

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